产品货号：
BTN130985
中文名称：
免DNA提取PCR试剂盒
英文名称：
Direct PCR Kit
产品规格：
400T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本制品是可以直接用新鲜的动物、植物、细菌样品的裂解液进行PCR扩增的试剂盒。免DNA提取PCR，即在传统PCR技术的基础上，免去DNA提取步骤。
- 操作简单，免去DNA提取、蛋白去除、RNA去除等步骤，5分钟即得用于PCR的模板。
- 兼容性广，可以用于几乎所有的分子生物学样品，包括细菌、昆虫、真菌、各种植物、各种动物、法医样品(包括全血液、血痕、精斑、唾液、毛发、组织样品、口腔细胞和FTA卡)、石蜡组织切片等。
- 提供离心管专用研磨杵，便于处理棘手样品。
- 环保健康，不使用任何有毒有害的试剂。
- 尤其适用于大规模育种筛选和临床筛选。
本试剂盒提供的试剂足够满足处理400份不同的样品所需的量，400次PCR实验。
| 组分 | 规格 |
| 免DNA提取PCR溶液A | 48mL |
| 免DNA提取PCR溶液B | 48mL |
| 2×PCR MasterMix | 1mL×6 |
| 离心管专用研磨杵 | 200只×2 |
保存：室温，其中2×PCR MasterMix需置于-20℃，有效期1年。
- 首次使用本制品时需要详细检查免DNA提取PCR溶液A和免DNA提取PCR溶液B是否有结晶析出。如果有需要37℃溶解后摇晃均匀待用。未用完部分可以放常温保存。
- 根据材料不同参考下表取少量样品到1.5mL塑料离心管中。
样品种类 取样量 动物组织 1～5mg 鼠尾 2mm长 血液样品 不超过20μL 植物叶片 1～5mg 植物种子(去皮) 1～5mg 酵母培养物 0.2～0.5mL培养物沉淀 细菌培养物 0.2～0.5mL培养物沉淀 - 未列出的样品，用户需要自己摸索最佳用量。对富含多醌多酚的植物材料(如棉花)，组织使用量最好不要超过0.5mg。
- 加入100μL免DNA提取PCR溶液A，确保免DNA提取PCR溶液A完全将样品淹埋。
- 用离心管专用研磨杵小心将样品在离心管内捣碎。血液一般情况捣碎30秒即可；实体组织需要捣碎到溶液的颜色变浑浊（植物叶片的话，溶液的颜色将变成绿色）。如需更多研磨杵，可从我司另购。对棘手的样品，还可以增加95℃保温10～60分钟一步，待温度冷却到室温后再进入下一步。残留的实体组织碎片不会影响后续试验。
- 加入100μL免DNA提取PCR溶液B，震荡10秒混匀。
- 常温12000rpm离心2分钟。
- 将上清液转移到一个干净的1.5mL离心管中。如果不用，可以放-80℃长期保存。如果用于后续PCR，请直接进入下步。
- 直接用裂解液作为模板设置30μL体系的PCR反应体系如下：
成分 用量 2×PCR MasterMix 15μL 细胞裂解液(来于上步) 1～5μL 自备PCR引物1(10μM) 1μL 自备PCR引物2(10μM) 1μL 超纯水 至30μL - 裂解液体积最好不要超过PCR体积的1/10。如果需要增加模板的加入量，则PCR体系应该相应的增加。如果加入5μL裂解液，则可以使用50μL的PCR体系。
- 放入PCR仪中进行PCR，PCR参数需要根据引物Tm值和靶分子长度等参数设置。一般不低于35次循环。
- PCR结束后取5～10μL直接上样电泳(本制品不需要上样液)，红色染料电泳速度相当于50bp DNA片段。
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